- 品名： TaKaRa CycleavePCR? 法沙門氏菌檢測試劑盒
- 品牌： TaKaRa
- 型號(hào)： CY205
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
| ■ 制品內(nèi)容 (25 μl × 50次量) |
| 2X Cycleave Reaction Mixture (2X conc.)625 μlSIN Primer/Probe Mix (FAM、ROX標(biāo)記) (5X conc.)*250 μldH2O1 mlSIN Positive Control150 μl (30次反應(yīng)量) * 含熒光標(biāo)記探針，應(yīng)避光保存。引物由SHIMADZU CORPORATION生產(chǎn)制造。 Limited Use Label License: [M40], [M46], [L4] |
| ■ 制品說明 |
| 沙門氏菌 (Salmonella) 是與E.Coil 和Shigella同屬于一群的重要腸道致病菌，這一類細(xì)菌在自然界中分布很廣，其中有2,500多種被確認(rèn)為血清型。近年來由于Salmonella Enteritidis引起的食物中毒急劇增加。 本制品是對(duì)大部分沙門氏菌都具有的基因－侵襲蛋白A (invasion protein A，invA) 基因進(jìn)行快速、準(zhǔn)確檢出的Real Time PCR試劑盒。在PCR反應(yīng)中每個(gè)循環(huán)包括三個(gè)過程：模板變性、引物退火、聚合酶作用下的延伸，該反應(yīng)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的指數(shù)倍擴(kuò)增，使用Real Time PCR可實(shí)時(shí)監(jiān)測擴(kuò)增過程。 制品中使用了改良后的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS，可防止在循環(huán)反應(yīng)前因引物錯(cuò)配、引物二聚體所產(chǎn)生的非特異性擴(kuò)增。 該檢測使用了Cycling Probe法。Cycling Probe法是由RNA和DNA構(gòu)成的雜合探針與RNase H組合使用的高靈敏度檢出法，能夠高效率地檢出擴(kuò)增過程中及擴(kuò)增結(jié)束時(shí)的目的基因片段。Cycling Probe內(nèi)部含有RNA堿基，一端標(biāo)記熒光物質(zhì)，另一端標(biāo)記熒光淬滅物質(zhì)，當(dāng)探針處于完整狀態(tài)時(shí)，由于熒光淬滅作用抑制熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，但當(dāng)探針與擴(kuò)增產(chǎn)物中的互補(bǔ)序列雜交后，RNase H在RNA部分將探針切斷，淬滅抑制作用解除，熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，通過測定熒光強(qiáng)度，能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)控?cái)U(kuò)增產(chǎn)物量。 制品中檢測沙門氏菌invA基因的探針熒光物質(zhì)使用了FAM標(biāo)記，內(nèi)參照檢測用探針的熒光物質(zhì)使用了ROX標(biāo)記，在同一反應(yīng)管內(nèi)對(duì)沙門氏菌invA基因及內(nèi)參照 (Internal Control) 同時(shí)進(jìn)行擴(kuò)增，通過兩種不同熒光標(biāo)記探針可以對(duì)invA基因和內(nèi)參基因同時(shí)檢定，實(shí)現(xiàn)雙通道同步檢測。其中，對(duì)內(nèi)參照反應(yīng)的檢測，可以監(jiān)控反應(yīng)是否正常進(jìn)行，防止假陰性結(jié)果的產(chǎn)生。本檢測無需電泳，簡單快速，靈敏度高、特異性強(qiáng)。 |
| ■ 保存 |
| -20℃。 |
| ■ 注意事項(xiàng) |
| 1. Real Time PCR儀的使用請按照說明書進(jìn)行。 2. 如果雜合探針、引物因混入核酸酶而被降解，則不能準(zhǔn)確進(jìn)行檢測。實(shí)驗(yàn)者的汗液和唾液也會(huì)帶入核酸酶，操作時(shí)應(yīng)注意。 3. PCR反應(yīng)是靈敏度非常高的反應(yīng)。為防止污染，建議從反應(yīng)液的配制到檢測的實(shí)驗(yàn)過程中，設(shè)定以下3個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域，并進(jìn)行物理性隔離。 |
| 區(qū)域1：反應(yīng)液的配制及分裝。區(qū)域2：檢測樣品的制備。區(qū)域3：向反應(yīng)液中添加檢測樣品，進(jìn)行反應(yīng)、檢出。由于本制品使用Real Time PCR法，擴(kuò)增反應(yīng)與檢測同時(shí)進(jìn)行，反應(yīng)后的擴(kuò)增產(chǎn)物不需要再進(jìn)行電泳。為了避免污染，嚴(yán)禁從Tube管中取出擴(kuò)增產(chǎn)物。 |
| 4. 使用本制品獲得的結(jié)果是以Real Time PCR儀的分析為基礎(chǔ)來判定的。如果Real Time PCR儀的任一功能出現(xiàn)問題都可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的判定結(jié)果，因此，要依據(jù)儀器說明書來正確設(shè)置Real Time PCR儀。 |
| CycleavePCR?SalmonellaDetectionKitVer.2.0 | |||
| 品牌 | CodeNo. | 產(chǎn)品名稱 | 包裝量 |
| Takara | CY205 | CycleavePCR?SalmonellaDetectionKitVer.2.0 | 50次 |
暫無內(nèi)容...
