百迪小鼠睪丸上皮細(xì)胞 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶
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- 品名: 百迪小鼠睪丸上皮細(xì)胞 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶
- 品牌: 百迪生物
- 型號(hào): C5001
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品概述 來源 小鼠睪丸 形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng) DMEM+10% FBS+1% P/S;空氣,95% ; 二氧化碳 (CO2),5% 傳代 1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定) 產(chǎn)品簡(jiǎn)介 15P-1細(xì)胞是從在生精上皮細(xì)胞中表達(dá)多瘤病毒(PyLT)的大T蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠睪丸細(xì)胞中建立的。15P-1細(xì)胞表現(xiàn)出支持細(xì)胞的特征,包括Wilms腫瘤(WT1)基因和Steel基因的轉(zhuǎn)錄。15P-1細(xì)胞通過膠乳珠的吞噬和死亡細(xì)胞的處理可以證實(shí)其具有吞噬活性,與生殖細(xì)胞的相互作用可以增強(qiáng)15P-1細(xì)胞的吞噬活性。在二倍體減數(shù)分裂前生殖細(xì)胞與表達(dá)精蛋白(Prm-1)基因的單倍體精細(xì)胞的共培養(yǎng)中,細(xì)胞可以進(jìn)行減數(shù)分裂和減數(shù)分裂后的分化。當(dāng)從未成熟的9日齡動(dòng)物中移植的睪丸細(xì)胞與15P-1細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí),在第一次減數(shù)分裂開始之前,睪丸細(xì)胞可以產(chǎn)生具有圓形精細(xì)胞形態(tài)的單倍體細(xì)胞四分體,并啟動(dòng)精蛋白轉(zhuǎn)錄。15P-1細(xì)胞分泌具有廣譜抗菌活性的蛋白酶敏感物質(zhì),在富含圓形精細(xì)胞和神經(jīng)生長(zhǎng)因子的組分存在下,15P-1培養(yǎng)基中抗菌物質(zhì)的活性增加10倍至50倍。支持細(xì)胞和15P-1細(xì)胞都可以表達(dá)KL蛋白,一種Kit受體的配體。15P-1細(xì)胞可以用于3D細(xì)胞培養(yǎng)。 收貨指南 1. T25細(xì)胞瓶到貨后處理方案:
(1) 驗(yàn)貨:培養(yǎng)瓶上標(biāo)簽、培養(yǎng)瓶完好性以及瓶口是否有漏液;
(2) 處置:75%酒精對(duì)培養(yǎng)瓶消毒后,放入37℃,5% CO2的培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)后,進(jìn)行顯微觀察、拍照,作為售后維權(quán)依據(jù);
(3) 注意:貼壁細(xì)胞在運(yùn)輸過程中發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正常現(xiàn)象,靜置后可恢復(fù)貼壁。
2. 凍存管到貨后處理方案:
(1) 驗(yàn)貨:包裝的標(biāo)簽、包裝內(nèi)是否有干冰、凍存管完好性;
(2) 處置:盡快復(fù)蘇(見培養(yǎng)方法)或程序降溫后轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
培養(yǎng)方法 對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1. 若離心對(duì)細(xì)胞影響不大,可將細(xì)胞懸浮液收集在試管中;
2. 150x g離心5分鐘,棄上清;
3. 加入新鮮培養(yǎng)液,按1∶2或1∶3的比例分裝到2或3個(gè)培養(yǎng)瓶中(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定);
或:
1. 若離心對(duì)細(xì)胞影響大,培養(yǎng)瓶直立靜置半小時(shí)左右,待大部分細(xì)胞都沉降到細(xì)胞瓶底,吸出1/2~2/3的舊培養(yǎng)基;
2. 加入新鮮培養(yǎng)液,按1∶2或1∶3的比例分裝到2或3個(gè)培養(yǎng)瓶中(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定),再逐瓶加入新鮮培養(yǎng)基。
對(duì)于貼壁細(xì)胞:
1. 盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2. 加3-4mL 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,吸走潤(rùn)洗的PBS;
3. T25瓶加1mL左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層;
4. 將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5. 消化到細(xì)胞間隙變大,但未完全脫落時(shí)加2-3mL完全培養(yǎng)基終止胰酶消化;
6. 混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7. 加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8. 補(bǔ)足完全培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。 生物安全等級(jí) 1
請(qǐng)?jiān)跓o菌環(huán)境中操作,避免污染;
為了保護(hù)細(xì)胞的穩(wěn)定性,細(xì)胞傳代次數(shù)不宜過多;
為了結(jié)果的可靠性,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好;
嚴(yán)格遵守生物安全操作規(guī)程。
免責(zé)聲明 本產(chǎn)品僅用于科研目的,不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應(yīng)遵循國(guó)家和地區(qū)的法律法規(guī),自行承擔(dān)使用本產(chǎn)品所產(chǎn)生的一切風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任。
請(qǐng)?jiān)谑褂们白屑?xì)閱讀本說明書,并按照指導(dǎo)操作。如有任何疑問或需要進(jìn)一步信息,請(qǐng)與我們聯(lián)系。
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