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- 品名: 百迪小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化
- 品牌: 百迪生物
- 型號(hào): C6228
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品概述
來(lái)源 | 骨髓 |
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形態(tài) | 貼壁、成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng) | 專(zhuān)用培養(yǎng)基37℃ 5%CO2 |
傳代 | 0.25%胰蛋白酶消化1min30s左右,比例1:3-1:4 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介 | 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化(Immortalized mouse bone marrow-deriv ed mesenchymal stromal cells)分離自balbc小鼠,通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方 式攜帶SV40基因 ,可以長(zhǎng)期傳代。該細(xì)胞為成纖維細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)。 細(xì)胞具有多向分化潛能,可用于干細(xì)胞研究,并能為細(xì)胞治療與基因治療 領(lǐng)域研究提供參考依據(jù)。 |
收貨指南 | 1. T25細(xì)胞瓶到貨后處理方案: (1) 驗(yàn)貨:培養(yǎng)瓶上標(biāo)簽、培養(yǎng)瓶完好性以及瓶口是否有漏液; (2) 處置:75%酒精對(duì)培養(yǎng)瓶消毒后,放入37℃,5% CO2的培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)后,進(jìn)行顯微觀察、拍照,作為售后維權(quán)依據(jù); (3) 注意:貼壁細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象,靜置后可恢復(fù)貼壁。 2. 凍存管到貨后處理方案: (1) 驗(yàn)貨:包裝的標(biāo)簽、包裝內(nèi)是否有干冰、凍存管完好性; (2) 處置:盡快復(fù)蘇(見(jiàn)培養(yǎng)方法)或程序降溫后轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 |
培養(yǎng)方法 | 1.培養(yǎng)基: 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化專(zhuān)用培養(yǎng)基。 2. 復(fù)蘇: (1)解凍:用鑷子將凍存管浸于37 ℃水??;反復(fù)搖晃,迅速完成解凍; (2)離心:噴灑75%酒精消毒后,在無(wú)菌環(huán)境下,打開(kāi)凍存瓶,用移液 器將細(xì)胞連同凍存液移至含1 mL完全培養(yǎng)基的10 mL離心管中,室溫 1000 rpm離心3-5 min,細(xì)胞沉于離心管底部; (3)培養(yǎng):將上清液輕輕棄去,加2 mL完全培養(yǎng)基,輕柔懸起細(xì)胞,然 后將所有細(xì)胞懸液移至含有3 mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中,于37 ℃, 5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng); (4)觀察:每日觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)(培養(yǎng)基顏色、細(xì)胞貼壁情況、形態(tài) 與密度等)并拍照。 3. 傳代: 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%開(kāi)始傳代 (1)清洗:無(wú)菌下吸出培養(yǎng)基,用37 ℃預(yù)熱的PBS清洗一次; (2)消化:加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液,轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶令其浸潤(rùn)所有細(xì) 胞,室溫(或37 ℃)消化,顯微鏡下觀察到細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速 拿回超凈臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1 mL完全培養(yǎng)基終止消化; (3)離心:用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中,在 1200 rpm離心3-5 min; (4)培養(yǎng):無(wú)菌下棄上清液,加1 mL完全培養(yǎng)基懸起細(xì)胞并移至T25培 養(yǎng)瓶中;按1∶3 - 1 : 4比例添加完全培養(yǎng)基,用移液器輕柔吹勻后,分裝 至培養(yǎng)瓶中,于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 |
生物安全等級(jí) | 1 請(qǐng)?jiān)跓o(wú)菌環(huán)境中操作,避免污染; 為了保護(hù)細(xì)胞的穩(wěn)定性,細(xì)胞傳代次數(shù)不宜過(guò)多; 為了結(jié)果的可靠性,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好; 嚴(yán)格遵守生物安全操作規(guī)程。 |
免責(zé)聲明 | 本產(chǎn)品僅用于科研目的,不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應(yīng)遵循國(guó)家和地區(qū)的法律法規(guī),自行承擔(dān)使用本產(chǎn)品所產(chǎn)生的一切風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任。 請(qǐng)?jiān)谑褂们白屑?xì)閱讀本說(shuō)明書(shū),并按照指導(dǎo)操作。如有任何疑問(wèn)或需要進(jìn)一步信息,請(qǐng)與我們聯(lián)系。 |
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