百迪免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基1000ml
- 品名： 百迪免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基1000ml
- 型號： S103-1000
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | 免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基用于激活擴(kuò)增人 CIK 細(xì)胞： 1. 在免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基中依次加入 INF-γ、IL-2 和 OKT3，可促使 CIK 細(xì)胞按照時間敏 感的方式在體外高效生長。 2. 第 1 天添加 INF-γ，促進(jìn)和增強(qiáng) IL -2 介導(dǎo)的細(xì)胞增殖。并且激活 PBMCs 中存在的單核 細(xì)胞，協(xié)同促進(jìn) CIK 細(xì)胞增殖并增加其細(xì)胞毒活性。推薦濃度為 1000IU/mL。 3. 第 2 天加入最終濃度為 500 IU/mL 的 IL-2，并在整個 14 天的培養(yǎng)期間持續(xù)補(bǔ)充，以誘導(dǎo) CIK 細(xì)胞增殖和細(xì)胞溶解活性。 4. OKT3 在第 2 天添加，最終濃度為 50 ng/mL。OKT3 一種抗 cd3 抗體，通過 IL-2 依賴機(jī) 制刺激 CIK 增殖。 免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基用于激活擴(kuò)增人 NK 細(xì)胞： 1. 免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基添加 100-200IU/ml 的 IL-2，確保 NK 細(xì)胞的增值和活化并有助 于提高細(xì)胞毒性，與 IL-15 聯(lián)合應(yīng)用可促進(jìn) NK 細(xì)胞的增殖，有利于 NK 細(xì)胞的激活。 2. CD56 和 CD16 是人 NK 細(xì)胞的特異性標(biāo)志物，可以通過磁珠細(xì)胞分選或流式細(xì)胞儀鑒 別和分離不受其它淋巴細(xì)胞污染的 NK 細(xì)胞。 免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基用于激活擴(kuò)增人 T 淋巴細(xì)胞： 1. 外周血單個核細(xì)胞(pbmc)或分選的 CD3+ T 細(xì)胞可用于 T 細(xì)胞培養(yǎng)，可使用商品化 T 細(xì) 胞分離試劑盒對 CD3+ T 細(xì)胞進(jìn)行分選。 2. 建議在培養(yǎng)容器中播種密度為 1-2×106 個細(xì)胞/mL，低播種密度會導(dǎo)致 T 細(xì)胞激活失敗， 而高播種密度會降低激活效率。 3. 激活 T 細(xì)胞常用的方法有兩種：抗體涂層或 CD3/CD28 免疫磁珠激活。對于抗體包被， 細(xì)胞培養(yǎng)在含有 1mg /mL 抗 CD28 抗體和 200 IU/mL IL-2 的 581-10 培養(yǎng)基中； CD3/CD28 免疫磁珠活化利用免疫磁珠細(xì)胞分離技術(shù)，并加入 IL-2 以達(dá)到 1:1 的磁珠與 細(xì)胞比例。 免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基用于激活擴(kuò)增人 CAR-T 細(xì)胞： 1. 第一天，外周血單核細(xì)胞(PBMCs)采用密度梯度離心法用淋巴細(xì)胞分離液進(jìn)行分離， CD3+ T 細(xì)胞根據(jù)商業(yè)化 T 細(xì)胞分離試劑盒提供的操作流程進(jìn)行分離； 2. CD3+ T 細(xì)胞激活：CD3+ T 細(xì)胞用商業(yè)化抗 CD3/CD28 磁珠進(jìn)行激活，培養(yǎng)基中需添 加 1000 IU/mL IL-2。 3. 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)：第 3 天慢病毒-CD19 CAR 轉(zhuǎn)導(dǎo) CD3+T 細(xì)胞。 4. 細(xì)胞擴(kuò)增 11-14 天，每 3-4 天加入含 IL-2 的 BD581-10 新鮮培養(yǎng)基，以 1×106 /mL 稀 釋細(xì)胞懸液，然后在第 13-14 天收集細(xì)胞。 |
| 注意事項(xiàng) | 1. 本產(chǎn)品不含 IL-2。由于免疫細(xì)胞的激活和生長依賴于外源性細(xì)胞因子如 IL-2，因此有必 要添加 IL-2，最終濃度為 200 至 1,000 IU/mL，具體取決于所研究的細(xì)胞類型。 2. 本產(chǎn)品無需添加自體血漿即可用于 CIK 和 T 細(xì)胞的培養(yǎng)；然而，加入低百分比熱滅活的 自體血漿已被證明可以提高激活效率和細(xì)胞擴(kuò)增。我們建議加入 5%的自體血漿培養(yǎng) CIK 細(xì)胞，2%的自體血漿培養(yǎng) T 細(xì)胞。人自體血漿可被人 AB 血清取代。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 2-8℃保存，有效期 12 個月。 |
產(chǎn)品詳情
免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基除含有可注射級的人血清白蛋白和重組人胰島素外，不存在其它蛋白 質(zhì)成分，含抗生素（硫酸卡那霉素），酚紅作為 pH 值指示劑。專門用于 CIK（細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞）和 DC-CIK（樹突狀細(xì)胞-細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞）細(xì)胞的激活和擴(kuò)增。通過適當(dāng)?shù)募?xì)胞因子和 抗體刺激，也可用于激活和擴(kuò)增人 T 細(xì)胞、腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（TIL）、CAR-T 細(xì)胞、CAR-NK 細(xì)胞和 NK 細(xì)胞。推薦該培養(yǎng)基用于過繼免疫治療應(yīng)用和細(xì)胞免疫反應(yīng)實(shí)驗(yàn)研究。
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