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- 品名: 百迪無(wú)血清干細(xì)胞專用凍存液500ml
- 型號(hào): A402-500
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品信息
適用范圍 | 試劑 |
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使用方法 | (一) 細(xì)胞凍存 1. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,加入 PBS 清洗細(xì)胞; 2. 去除 PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面) 室溫孵育 2~3 min,把單層生長(zhǎng)細(xì)胞 消化下來(lái); 3. 加入雙倍體積的完全培養(yǎng)基或胰酶終止劑終止細(xì)胞消化(如果凍存細(xì)胞為懸浮細(xì)胞按照步 驟 4-8 進(jìn)行操作); 4. 將消化后的細(xì)胞懸液或者懸浮細(xì)胞液轉(zhuǎn)移至離心管中,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù); 5. 室溫 1000 rpm 離心 5 min;棄掉上清液。 6. 加入適量 4℃預(yù)冷的無(wú)血清干細(xì)胞專用凍存液重懸細(xì)胞沉淀,制成細(xì)胞懸液(按照細(xì)胞密 度 和 所 用 細(xì) 胞 凍 存 管 的 尺 寸 計(jì) 算 所 需 凍 存 液 的 量 , 推 薦 凍 存 密 度 : 5x105- 1x107cells/mL)。 7. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管 1~1.5 ml; 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作 者; 8. 將凍存細(xì)胞放入-80℃冰箱,24h 后轉(zhuǎn)入移至液氮罐中長(zhǎng)期冷凍保存。 (二) 細(xì)胞復(fù)蘇 1. 將水浴鍋溫度調(diào)至 37℃,取出凍存管快速置于水浴鍋內(nèi),晃動(dòng)凍存管直至管中凍存細(xì)胞 融化成液體; 2. 將溶解的細(xì)胞凍存懸液轉(zhuǎn)移至含有 5-10 倍體積完全培養(yǎng)基的離心管中,待凍存管中細(xì)胞 完全融化后,將凍存細(xì)胞懸液緩慢加入離心管中,輕輕混勻; 3. 室溫 1000 rpm 離心 5 min; 去除上清液,加入已回溫的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進(jìn)行細(xì) 胞計(jì)數(shù),根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果,取適量的細(xì)胞懸液接種到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi); 4. 將復(fù)蘇好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至 37℃,5% CO2 培養(yǎng)箱中,按常規(guī)方法培養(yǎng)。 |
注意事項(xiàng) | 1. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴(yán)禁使用。 2. 請(qǐng)遵守嚴(yán)格無(wú)菌的工作規(guī)范,操作過(guò)程避免污染。 3. 使用前應(yīng)詳細(xì)閱讀使用說(shuō)明書,在有效期內(nèi)使用。 4. 本產(chǎn)品含有 DMSO,建議用戶在低溫條件下(4℃或冰上)進(jìn)行操作,凍存細(xì)胞后應(yīng)盡量 減少凍存細(xì)胞在外存放時(shí)間,盡快移入-80℃超低溫冰箱長(zhǎng)期保存。 5. 部分對(duì) DMSO 敏感的細(xì)胞,建議使用本產(chǎn)品前對(duì)其進(jìn)行試驗(yàn)性凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng),確認(rèn) 性能后再進(jìn)行正式凍存。 6. 該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),以免影響凍存效率。 |
聲明 | 僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。 |
保存條件 | 2°C-8°C保存,有效期18個(gè)月。 |
產(chǎn)品詳情
BDBIO 無(wú)血清干細(xì)胞專用凍存液是一款專門針對(duì)干細(xì)胞凍存而研發(fā)的凍存液,采用滲透性保 護(hù)劑、非滲透性保護(hù)劑、細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑、細(xì)胞膜保護(hù)劑組合的方案對(duì)細(xì)胞進(jìn)行全方位低溫 保護(hù),可使凍存過(guò)程中溶液冰點(diǎn)降低,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透 出細(xì)胞,防止或減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷,同時(shí)降低冰凍時(shí)細(xì)胞周圍電解質(zhì)濃度,避免電解質(zhì) 損傷,還可以延緩凍存過(guò)程中細(xì)胞的互相擠壓,保護(hù)細(xì)胞膜,從而有效提高細(xì)胞復(fù)蘇率和活 力。本產(chǎn)品無(wú)需程序降溫,且無(wú)動(dòng)物成分、無(wú)血清,化學(xué)成分明確,可在穩(wěn)定干細(xì)胞細(xì)胞表 型和生長(zhǎng)狀態(tài)和保持細(xì)胞多能性的同時(shí)提供最佳的細(xì)胞回收效率。
此外 BDBIO 還提供無(wú)酚紅的無(wú)血清干細(xì)胞專用凍存液(#A403-500,#A403-100, #A403-50)以滿足不同的干細(xì)胞凍存需求。