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- 品名: 百迪無(wú)血清細(xì)胞凍存液(無(wú)酚紅)500ml
- 型號(hào): A401-500
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品信息
適用范圍 | 試劑 |
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使用方法 | (一) 細(xì)胞凍存 1. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,加入 PBS 清洗細(xì)胞; 2. 去除 PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面) 室溫孵育 2~3 min,把單層生長(zhǎng)細(xì) 胞消化下來(lái); 3. 加入雙倍體積的完全培養(yǎng)基或胰酶終止劑終止細(xì)胞消化(如果凍存細(xì)胞為懸浮細(xì)胞 按照步驟 4-8 進(jìn)行操作); 4. 將消化后的細(xì)胞懸液或者懸浮細(xì)胞液轉(zhuǎn)移至離心管中,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù); 5. 室溫 1000 rpm 離心 5 min;棄掉上清液。 6. 加入適量 4℃預(yù)冷的無(wú)血清細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞沉淀,制成細(xì)胞懸液(按照細(xì)胞密度和所 用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存液的量,推薦凍存密度:5x105 至 1x107cells/mL。) 7. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管 1~1.5 ml; 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作 者; 8. 將凍存細(xì)胞放入-80℃冰箱,24h 后轉(zhuǎn)入移至液氮罐中長(zhǎng)期冷凍保存。 (二) 細(xì)胞復(fù)蘇 1. 將水浴鍋溫度調(diào)至 37℃,取出凍存管快速置于水浴鍋內(nèi),晃動(dòng)凍存管直至管中凍存細(xì)胞 融化成液體; 2. 將溶解的細(xì)胞凍存懸液轉(zhuǎn)移至含有 5-10 倍體積完全培養(yǎng)基的離心管中,待凍存管中細(xì)胞 完全融化后,將凍存細(xì)胞懸液緩慢加入離心管中,輕輕混勻; 3. 室溫 1000 rpm 離心 5 min; 去除上清液,加入已回溫的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進(jìn)行細(xì) 胞計(jì)數(shù),根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果,取適量的細(xì)胞懸液接種到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi); 4. 將復(fù)蘇好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至 37℃,5% CO2 培養(yǎng)箱中,按常規(guī)方法培養(yǎng)。 |
注意事項(xiàng) | 1. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴(yán)禁使用。 2. 請(qǐng)遵守嚴(yán)格無(wú)菌的工作規(guī)范,操作過(guò)程避免污染。 3. 使用前應(yīng)詳細(xì)閱讀使用說(shuō)明書,在有效期內(nèi)使用。 4. 本產(chǎn)品含有 DMSO,建議用戶在低溫條件下(4℃或冰上)進(jìn)行操作,凍存細(xì)胞后應(yīng)盡量 減少凍存細(xì)胞在外存放時(shí)間,盡快移入-80℃超低溫冰箱長(zhǎng)期保存。 5. 部分對(duì) DMSO 敏感的細(xì)胞,建議使用本產(chǎn)品前對(duì)其進(jìn)行試驗(yàn)性凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng),確認(rèn) 性能后再進(jìn)行正式凍存。 6. 該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),以免影響凍存效率。 |
聲明 | 僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。 |
保存條件 | 2°C-8°C保存,有效期18個(gè)月。 |
產(chǎn)品詳情
BDBIO 無(wú)血清細(xì)胞凍存液(無(wú)酚紅)是一款即用型細(xì)胞凍存試劑。廣泛適用于多種哺乳動(dòng)物 細(xì)胞(腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞)的凍存。產(chǎn)品經(jīng)過(guò)配方優(yōu)化、不含血清、動(dòng)物源成分,含有糖、 氨基酸、優(yōu)質(zhì)白蛋白等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和更低的 DMSO 含量配比。大大提高了細(xì)胞的復(fù)蘇率和活 力,可用于細(xì)胞長(zhǎng)期保存。本產(chǎn)品不僅可以避免使用血清,降低血清中未知成分和病毒等感 染物質(zhì)給凍存帶來(lái)的影響與風(fēng)險(xiǎn),同時(shí),可省去繁瑣費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程,細(xì)胞可重懸于本 產(chǎn)品后直接置于-80℃冰箱長(zhǎng)期保存,或次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個(gè)凍存過(guò)程。
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